人腸靜脈內皮細胞

培養步驟:
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品： 

0.188ng/ml大鼠白介素2(IL-2)ELISA試盒 (β -Asp3)-GRF (human)

0.938ng/ml大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試盒GRF (human)

1.875ng/ml大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試盒 GRF (free acid) (human)

46.875pg/ml大鼠白介素18(IL-18)ELISA試盒GRF (bovine)

0.094ng/ml大鼠白介素17(IL-17)ELISA試盒GRF (1-29) amide (rat)

1.875ng/ml大鼠白介素16(IL-16)ELISA試盒N-2-Aminoethyl-Val-Leu-anilide

46.875pg/ml大鼠白介素15(IL-15)ELISA試盒(Des-octanoyl)-Ghrelin(mouse, rat)

0.938ng/ml 大鼠白介素13(IL-13)ELISA試盒(Des-octanoyl)-Ghrelin(human)

0.094ng/ml大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試盒Ghrelin (mouse, rat)

37.5pg/ml大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試盒Ghrelin (human)
人腸靜脈內皮細胞谷胱甘肽S轉移酶α4(GSTα4)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)洛沙坦咪唑并[1,5-b]喹啉雜質

中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)洛沙坦三苯基醚

Ⅹ組脂酶A2(PLA2G10)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)N-三苯基羧洛沙坦

剪接因子3B亞基3(SF3B3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)O-酰洛沙坦

整合素α6(ITGα6)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)洛沙坦N2-葡萄糖苷

防御素β103A(DEFβ103A)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)洛沙坦

凝因子ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)羥孕-d3

ⅡA組脂酶A2(PLA2G2A)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)咪唑代-β-D-葡萄糖苷

分泌型卷曲相關蛋白4(SFRP4)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)美洛西林

分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)二去基米非司

酪氨3/色氨5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)22-羥基米非司

色胺羥化酶2(TPH2)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)N-去基米非司

內向整流型鉀離子通道亞家族J成員5(KCNJ5)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)米平-d3

蛋白信號調節因子6(RGS6)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)米平N-氧化物

無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)10-氧米平(米平雜質F)